增強(qiáng)型細(xì)胞活力/毒性檢測試劑盒
（增強(qiáng)型CCK-8）說明書
增強(qiáng)型CCK-8細(xì)胞活力測定試劑根據(jù)專有配方配制，同等用量下的靈敏度為傳統(tǒng)CCK-8試劑3~5倍，明顯高于國內(nèi)某知名品牌產(chǎn)品。可用于檢測細(xì)胞活力，可用于細(xì)胞增殖和毒性分析，方法簡便而準(zhǔn)確。
試劑的優(yōu)點：
1. 結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，試劑不影響細(xì)胞活力，顯色產(chǎn)物直接溶解于培養(yǎng)液，直接測定OD值即可準(zhǔn)確反應(yīng)細(xì)胞活力。
2. 操作省時簡單，試劑即開即用，無需配制；只需一步操作，即可測定。
3. 安全性好，不含放射性同位素和有害有機(jī)溶劑，使用安全。
4. 靈敏度高，靈敏度高于MTT、XTT及CCK-8等方法，同等用量下的靈敏度為傳統(tǒng)CCK-8試劑3~5倍。
使用方法：
1. 使用96孔板，細(xì)胞培養(yǎng)和處理完畢。
2. 迅速加入增強(qiáng)型CCK-8試劑，每孔100μl 培養(yǎng)基中加入10μl增強(qiáng)型CCK-8試劑。
3. 培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，37℃孵育1~4小時。
4. 于450nm處測定OD值。
5. 結(jié)果分析 將各測試孔的OD值減去對照孔或調(diào)零孔OD值。各平行孔的OD值取平均數(shù)。
細(xì)胞活力% =（加藥細(xì)胞OD-空白OD）/（對照細(xì)胞OD-空白OD）×100%
6. 若使用96孔外的培養(yǎng)板，試劑用量等比例增減。
使用注意事項：
1. 首次使用時，建議先做幾個孔摸索條件，考察接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時間。
2. 加入試劑速度要快，以避免試劑殘留和加樣速度不一所致反應(yīng)時間不同造成的顯色誤差。有條件的情況下，建議采用多通道移液器，可以減少平行孔間的差異。為避免槍頭上的殘留所帶來的加樣誤差，增強(qiáng)型CCK-8試劑可在加樣前用培養(yǎng)基稀釋混勻。
3. 試劑加入后輕輕振搖培養(yǎng)板，使增強(qiáng)型CCK-8試劑與培養(yǎng)基充分混勻。
4. 試劑加入后培養(yǎng)時間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔細(xì)胞數(shù)量的多少而異。對于貼壁細(xì)胞，加入增強(qiáng)型CCK-8的培養(yǎng)時間一般為1~4小時，但在培養(yǎng)30分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度（根據(jù)細(xì)胞種類而定）。與貼壁細(xì)胞相比，懸浮細(xì)胞較難顯色。對于懸浮細(xì)胞，在加入增強(qiáng)型CCK-8培養(yǎng)1~4小時后，可先從培養(yǎng)箱中取出，目測染色程度或用酶標(biāo)儀測定決定。白細(xì)胞較難顯色，因此需要較長的增強(qiáng)型CCK-8反應(yīng)時間或增加細(xì)胞數(shù)量（105個細(xì)胞/孔）。若顯色困難，可以將培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，繼續(xù)培養(yǎng)數(shù)小時后再確定。
5. 如果實驗中有還原劑，需要檢查背景的OD值，即在不含細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入藥物，然后加入增強(qiáng)型CCK-8試劑在一定時間內(nèi)檢測，和不加藥物的培養(yǎng)基進(jìn)行比較（只加增強(qiáng)型CCK-8試劑），如果OD值明顯偏高，則說明有反應(yīng)。
6. 若細(xì)胞培養(yǎng)時間較長導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色或pH發(fā)生變化，建議更換新鮮培養(yǎng)基后再加入增強(qiáng)型CCK-8試劑。含有酚紅的培養(yǎng)基不影響本試劑的使用。
7. 如果樣品為高渾濁度的細(xì)胞懸液，建議設(shè)定600nm（或600nm以上）作為參比波長，扣除參比波長的OD值即可。
8. 如果要測定細(xì)胞的具體數(shù)量，需要先做一個標(biāo)準(zhǔn)曲線。
9. 若測得OD值過高，可酌減鋪板細(xì)胞數(shù)或增強(qiáng)型CCK-8試劑用量。
試劑包裝：
100次：1ml×1瓶；500次：5ml×1瓶；3,000次：5ml×6瓶；5,000次：5ml×10瓶；10,000次：100ml×1瓶。
貯藏條件：
增強(qiáng)型CCK-8在避光0~5℃的條件下可存放一年，測定效果完全不變。在-20℃的條件下可以貯存更久。反復(fù)凍融會增加背景值，經(jīng)常使用時請于0~5℃條件下保存。
本產(chǎn)品僅供科研使用，不做其它用途。
